片形吸虫病是一种流行于世界各地的人兽共患寄生虫病,已严重威胁到人畜健康。本研究旨对云南省大理地区的片形吸虫进行虫种鉴定,并分析其遗传多样性。在大理州下关镇农贸市场采集的122只片形吸虫(取自牛肝),对核糖体内转录间隔子(ITS)、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶亚基1 (ND1)和线粒体细胞色素c氧化酶亚基1 (CO1)的核苷酸序列进行扩增、测序并进行同源性分析。利用杂合位点的峰高比值测定不同ITS等位基因的杂合度。利用核蛋白编码基因磷酸烯醇丙酮酸羧酸激酶(pepck)的多重PCR技术进行虫种鉴定。并通过ND1基因的多序列比对分析遗传多样性。结果,7个ITS序列为肝片形吸虫型,115个ITS序列为Fh/Fg杂合型。共发现11个具有双峰的杂合位点,杂合比率个体间差异显著。ND1和CO1结果表明,仅1份样本为肝片形吸虫,其余121份样本与巨片形吸虫相同或含有一个变异点。pepck多重PCR结果显示,大理种群的全部片形吸虫样本均扩增出肝片形吸虫和巨片形吸虫的双重条带,均为杂合型片形吸虫。结合ITS、ND1、CO1序列和pepck多重PCR结果,鉴定的122份样本均为Fh/Fg杂合型片形吸虫。实验结果初步证实了大理地区片形吸虫Fg/Fh高度杂合的特征。同时表明选择多个分子标记进行并行分析,将提供更全面、准确的遗传信息。
唐梦婷硕士研究生为第一作者,许学年研究员为通讯作者。该文2021年6月发表在《Parasitol International》。
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